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兔子雌二醇ELISA試劑盒

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兔子雌二醇 E2 ELISA試劑盒 rabbit Estradiol,E2 ELISA試劑盒

更新時(shí)間:2024-08-17;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:686

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(1) 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴(kuò)散或免疫電泳法,使抗原與抗體形成沉淀線,經(jīng)PBS漂洗1天,再以蒸餾水浸泡1小時(shí),將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色,如果出現(xiàn)應(yīng)有的顏色反應(yīng),再用生理鹽水浸泡,顏色仍然不褪,表示結(jié)合物既有酶的活性,也有抗體活性。良好的結(jié)合物在顯色后,瓊擴(kuò)滴度應(yīng)在1:16以上。另一個(gè)測(cè)定方法是用系列稀釋的酶標(biāo)抗體直接以ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)方法進(jìn)行方陣滴定,此法不僅可以測(cè)定標(biāo)記效果,還可以確定酶標(biāo)抗體的使用濃度。   (2) 結(jié)合物的定量測(cè)定 一般是對(duì)結(jié)合物中的酶和IgG進(jìn)行定量測(cè)定。常用紫外分光光度計(jì)于403nm和280nm進(jìn)行測(cè)定,然后按下列公式計(jì)算:   酶量(mg/ml)=OD403×0.42   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62   對(duì)于過(guò)碘酸鈉氧化法制備的標(biāo)記抗體量,按下列公式計(jì)算:   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62   已知酶量和IgG量后,即可計(jì)算出標(biāo)記抗體的摩爾(mol)比值。   HRP/IgG摩爾比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4   結(jié)合物中酶總量=HRP(mg/ml)×結(jié)合物溶液量   結(jié)合物產(chǎn)率=結(jié)合物中酶總量/標(biāo)記時(shí)加入的酶量×100%   用于ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)的結(jié)合物的酶量為400(g/ml時(shí)效果一般,為500(g/ml時(shí)效果較好,達(dá) 1000(g/ml時(shí)效果。mol.比值由于結(jié)合物中含的IgG并不*可靠,所以不能作為主要參數(shù)。一般認(rèn)為mol.比值為0.7時(shí)效果一般,1.0時(shí)效果較好,1.5-2.0時(shí)。酶結(jié)合率為 7%時(shí)效果一般,為9%-10%較好,達(dá)30%以上時(shí)。

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