方法一 雙抗體夾心法
1. 包被:ELISA試劑盒用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過液。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 間接法
1.ELISA試劑盒用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過液;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;
6.’ELISA試劑盒zui后一遍用DDW洗滌。
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISA試劑盒
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 Mouse inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA試劑盒
小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 Mouse Histamine,HIS ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA試劑盒
小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISA試劑盒
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Mouse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA試劑盒
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Mouse interleukin 8,IL-8 ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D3 ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D2 ELISA試劑盒
小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒 Mouse estrogen,E ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D1 ELISA試劑盒
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA試劑盒
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA試劑盒
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA試劑盒
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Mouse prostate specific antigen,PSA ELISA試劑盒