分析ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測定報(bào)告單對ELISA實(shí)驗(yàn)的影響
ELISA試劑盒測定中單個(gè)空缺孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性,也就是說每次測定或同次測定空缺孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測定值,所以在ELISA測定比色時(shí),是使用雙波長比色。ELISA試劑盒因此,雙波長比色測定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對特異顯色測定吸光度的影響的長處。ELISA試劑盒比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按劃定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。
zui后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。ELISA試劑盒比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),測讀底物孔。
所謂的單波長比色等于通常的以對顯色具有zui大吸收的波長如450nm或492nm進(jìn)行比色測定;而雙波長雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長如450nm和非敏感波長630nm下各測定一次,敏感波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長下測定即改變波長至一定值,ELISA試劑盒使得樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測得的吸光度即為臟物的吸光度值。
在沒有細(xì)胞競爭的情況下,當(dāng)新骨髓祖細(xì)胞的流入在小鼠體內(nèi)被阻斷時(shí),老細(xì)胞就會(huì)重新獲得自我更新并zui終被改變的能力,導(dǎo)致“T-細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病”(T-ALL)的發(fā)生,ELISA試劑盒與人類的這種白血病相似。
與此同時(shí),基因表達(dá)會(huì)發(fā)生變化,也會(huì)出現(xiàn)經(jīng)常在人類T-ALL中所見到的基因突變。因此,細(xì)胞競爭會(huì)充當(dāng)一個(gè)“腫瘤抑制因子”機(jī)制。ELISA試劑盒這項(xiàng)研究也許還能幫助解釋用基因矯正過的自體祖細(xì)胞治療之后在“與X相關(guān)的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷”患者身上所看到的、被廣泛討論過的T-細(xì)胞白血病。