lb培養(yǎng)基配方與tb培養(yǎng)基配方之間的經驗
LB培養(yǎng)基和TB培養(yǎng)基這兩種培養(yǎng)基名字有點像,它們之間的區(qū)別在哪呢?首先是用途上,LB經常用來預培養(yǎng)菌種,而TB培養(yǎng)基則用于慢病毒載體等多種實驗中,另外,兩者的配方也是大有不同的。一起了解一下吧。
TB培養(yǎng)基的配方
去離子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml
搖動容器使溶質*溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時加入100 ml無菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是:用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,*溶解后,用去離子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。)
LB培養(yǎng)基的配方
10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉 加去離子水至1L 調PH 7.0-7.2 分裝 滅菌 即可用之
配方區(qū)別:
TB培養(yǎng)基,Terrific肉湯(Terrific Broth,TB)
1. 去離子水加至 900 ml 2. 胰蛋白胨 12 g, 3. 酵母提取物 24 g, 4. 甘油 4 ml
搖動容器使溶質*溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時加入100 ml無菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是:用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,*溶解后,用去離子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。)
LB培養(yǎng)基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化鈉(NaCl) 5g/L
另外根據經驗值用NaOH調節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達到7.4(該pH適合目前使用zui廣的原核表達菌種E.coli的生長)
其他區(qū)別:TB培養(yǎng)基是一種通用培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)。LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養(yǎng)基來預培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求.培養(yǎng)的菌種一般是經過改造的無法在外界環(huán)境單獨存活和擴增的工程菌.
zui后,值得注意的是,LB培養(yǎng)基配制好后,一定要在冷卻前加好抗生素。配TB培養(yǎng)基時,zui后分開滅菌,否則配出來的培養(yǎng)基容易因為營養(yǎng)缺失而發(fā)黑。