牛生長(zhǎng)激素 ELISA 檢測(cè)試劑盒內(nèi)容及配制
試驗(yàn)原理:
GH試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知GH濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將GH和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GH的濃度呈比例關(guān)系。
加入親和素標(biāo)記過的
試劑盒內(nèi)容及其配制:
試劑盒成份 | 96孔配置 | 48孔配置 |
96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板(96T) | 半塊(48T) |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 |
標(biāo)準(zhǔn)品:40ng/ml | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
空白對(duì)照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
生物素標(biāo)記的抗GH抗體 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) |
洗滌緩沖液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。牛生長(zhǎng)激素 ELISA 檢測(cè)試劑盒
試劑的準(zhǔn)備: 1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行: 40 ng/ml (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 20 ng/ml (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 10 ng/ml (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 5.0 ng/ml (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 2.5 ng/ml (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.25 ng/ml (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 0 ng/ml (空白對(duì)照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。牛生長(zhǎng)激素 ELISA 檢測(cè)試劑盒