人CXC趨化因子配體16洗滌方法:
1. 自動洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體
載脂蛋白C3抗體
細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體
?;o酶A合成酶家族4抗體
酸性磷酸酶樣蛋白2抗體
AHNAK核蛋白2抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體
p53誘導(dǎo)蛋白5抗體
錨蛋白重復(fù)域5抗體
腦鈉通道蛋白2抗體
腦鈉通道蛋白4抗體
小腸鈉通道蛋白5抗體
APXL蛋白抗體
酸敏感離子通道蛋白3抗體
天門冬氨酸β羥化酶抗體
精氨酸加壓素受體2抗體
細(xì)胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體
膜粘連蛋白8抗體
水通道蛋白8抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體
凋亡抑制因子5抗體
水通道蛋白-3抗體
載脂蛋白D抗體
丁?;o酶A合成酶3抗體
脂肪細(xì)胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體
線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體
ABL2蛋白抗體